一般来说，肿瘤恶性化表型研究，最常见的就是细胞迁移，细胞侵袭，细胞增殖的研究。那这3种实验具体怎么做呢？下面就和东极实验室一起来看一看！

检测细胞迁移能力：细胞划痕实验

实验步骤：

1. 细胞密度约80-90%时，分别进行实验组和对照组的细胞分盘。加入预热的胰酶消化细胞，显微镜下观察细胞脱离培养皿形成单个或者团状的细胞，加入培养基终止消化反应。然后轻轻吹打混匀细胞，将细胞均匀种于六孔板。

2. 24h后，待细胞均匀铺满，用枪头比着直尺，垂直划一条直线，注意枪头要垂直，不能倾斜。

3. PBS轻洗细胞3次，加入无血清培养基。

4. 放入37度5%CO2培养箱。按0、12、24小时取样，拍照。

检测细胞侵袭能力：Transwell

实验步骤：

1. 让细胞撤血清饥饿12－24h，去除血清的影响。

2. 在无菌条件下将Matrigel胶冰浴融化。然后用无血清培养基稀释配制Matrigel ，比例1：4-1：8，稀释后在Transwell小室上室铺40ul/孔。

3. 37℃放置2h，至Matrigel胶凝固,用无血清培养基水化30min。

4. 用预热胰酶消化细胞，显微镜下观察细胞脱离培养皿形成单个或者团状的细胞，加入培养基终止消化反应。

5. PBS轻洗细胞3次，用含BSA的无血清培养基重悬。调整细胞密度至1－10×105细胞处理后，取10万细胞铺到上室。

6. 48h后待细胞穿到下室，用棉签轻轻擦去基质胶和上室内的细胞。小室于室温彻底风干，以方便后一步染色。

7. 0.1%结晶紫染色。

8. PBS洗去多余结晶紫。

9. Transwell小室与正置显微镜进行观察和拍照，随机选取多个视野进行细胞计数。

检测细胞增殖能力：CCK8增殖实验

实验步骤：

1. 细胞消化为细胞悬液后，取 96孔板，每空加入100μL。置于培养箱预培养24小时（37℃，5% CO2）。在96孔板的四围可以加入PBS，主要是为了防止细胞培养过程中液体蒸发过多。

2. 12、24、48小时分别向培养板加入待测药物试剂。

3. CCK8检测：

（1）弃去培养基，并用培养基洗涤细胞两次，然后加入新的100ul培养基，向每孔加入10μLCCK8溶液。其中预留的PBS孔加入CCK8作为空白组。

（2）将培养板在37度培养箱内孵育1-4h。

（3）酶标仪测定在450nm处的吸光度。